Похоже, ваш пул приложений не запускается. Откройте диспетчер IIS и щелкните «Пулы приложений», затем проверьте столбец «Состояние» и убедитесь, что все говорят «Запущено» (или, по крайней мере, в вашем DefaultAppPool указано «Запущено»). Если он не запущен, щелкните правой кнопкой мыши пул приложений и выберите «Пуск». Если вы получили ошибку, сообщите нам, что это такое.
Кроме того, что это говорит в журнале событий вашего приложения?
РЕДАКТИРОВАТЬ:
Если сайт / виртуальный каталог настроен как приложение, то связанный пул приложений должен быть запущен и функционировать, чтобы он обслуживал любой ресурс, статический или нет. В противном случае вы получите ошибку 503 ответа. Идентификационные данные ваших пулов приложений установлены для вашей учетной записи? Звучит так, будто у вас произошла порча аккаунта. Попробуйте создать новую учетную запись (администратора) и настройте пул приложений для запуска с использованием этой учетной записи и посмотрите, начнут ли они работать.
Примечание. Проверьте, должен ли пользователь, работающий с IIS и пулом приложений, идентичным или назначил пользователя сетевой службы для пула приложений.